缺血性腦病是目前危害人類健康的重要病癥。對(duì)于腦血流以及腦血管微循環(huán)的研究成為腦血管疾病研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。但由于腦部結(jié)構(gòu)的特殊性，軟腦膜微血管研究成為腦血流研究的理想選擇。
使用Gene&I-MC1微血管分析系統(tǒng)，可對(duì)動(dòng)物軟腦膜進(jìn)行清晰成像，并得到軟腦膜血管的動(dòng)態(tài)變化。通過(guò)對(duì)圖像的處理分析，獲取軟腦膜血管的管徑、白細(xì)胞粘附、紅細(xì)胞速度、血管損傷等參數(shù)。對(duì)于研究腦血管藥物的藥效或者腦部疾病發(fā)病機(jī)制具有很大的幫助作用。
本例以內(nèi)皮素來(lái)觀察大鼠軟腦膜上細(xì)動(dòng)脈痙攣現(xiàn)象。
實(shí)驗(yàn)具體操作如下：
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：wistar大鼠，雄性，提供250g左右
實(shí)驗(yàn)儀器：Gene&I-MC1微血管分析系統(tǒng)
試劑：內(nèi)皮素、20%烏拉坦
器材：手術(shù)剪刀、小彎鑷、眼科剪、縫合線、顱骨鉆
具體操作
1.20%烏拉坦肌肉注射麻醉大鼠。
2.大鼠俯臥，使用專用的腦部固定裝置固定大鼠頭部。去掉大鼠顱骨表面皮毛，暴露顱骨。使用顯微鑷去掉顱骨表面筋膜。使用顱骨鉆沿骨縫內(nèi)側(cè)磨薄一矩形區(qū)域，面積5mm×5mm.至手感骨片浮動(dòng)時(shí)，使用彎鑷提起骨片，去掉。暴露軟腦膜表面。
3.將暴露的大鼠軟腦膜表面置于Gene&I-MC1微血管分析系統(tǒng)鏡頭下，選取20-40μm寬，200μm長(zhǎng)的細(xì)動(dòng)脈，進(jìn)行微血管的觀察。并進(jìn)行動(dòng)態(tài)視頻錄制。
4.細(xì)動(dòng)脈痙攣：在軟腦膜表面添加4-5滴內(nèi)皮素，再次對(duì)軟腦膜上的細(xì)動(dòng)脈觀察并進(jìn)行視頻錄制。
5.打開(kāi)分析軟件，將錄制的軟腦膜細(xì)動(dòng)脈視頻導(dǎo)入，分析軟腦膜細(xì)動(dòng)脈在滴加內(nèi)皮素前后血管管徑、血細(xì)胞運(yùn)動(dòng)速度的變化。